大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞是在哺乳動物骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的細胞亞群，具有多種分化潛能，可分化成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)和成肌細胞。它們不僅機械地支持骨髓中的造血干細胞(HSC)，而且還分泌多種生長因子（如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF）來支持造血。

　　常用的MSC分離方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法。全骨髓法是根據(jù)干細胞在低血清培養(yǎng)基中的優(yōu)勢特性，定期更換溶液去除非貼壁細胞，從而達到純化和擴增MSC的目的。密度梯度離心是根據(jù)骨髓中各細胞成分的不同比例，分離出單核細胞進行貼壁培養(yǎng)，兩者本質(zhì)上沒有太大區(qū)別。隨著對MSC表面抗原認識的深入，有人采用免疫方法，如流式細胞儀、免疫磁珠等。然而，流式或磁珠分選細胞增殖緩慢等問題，加上成本高、技術(shù)難度大等問題，在一定程度上限制了這些方法的廣泛應(yīng)用。

 

　　大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞細胞培養(yǎng)必須保持工作區(qū)域無菌和清潔。先用紫外線燈和臭氧消毒1h，然后通風30min。操作前需更換細胞間專用拖鞋，戴上一次性橡膠手套并用75%乙醇消毒，戴上實驗服，戴上一次性口罩和帽子，操作時不要大聲說話，整個無菌操作應(yīng)在酒精燈周圍進行。

　　在大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的原代培養(yǎng)過程中，可在約24小時內(nèi)發(fā)生貼壁生長。細胞呈圓形、梭形和三角形，生長緩慢。液體交換后細胞增殖明顯，呈梭形為主，形態(tài)多樣。70%-80%可在10-14天融合，達到通過標準。傳代細胞形狀單一，有紡錘形或扁平形，增殖至細胞融合時呈渦旋狀和放射狀排列。